Update: 2025-04-03
Raheleh Shakeri
Faculty of Science / Department of Biology
M.Sc. Theses
-
Green synthesis of selenium nanoparticles using fruit and leaf extracts of two varieties of Vaccinium corymbosum (Jewel & Emerald) and evaluation of of their biological activities
2024In recent years, the use of green synthesis has been used as a suitable method for producing nanoparticles. Blueberries contain phenolic compounds with high antioxidant activity. Anthocyanins in blueberries have anticancer, antidiabetic and antibacterial properties. This study was conducted to investigate the effect of selenium nanoparticles synthesized from blueberry fruit extracts of two varieties Jewel and Emerald and blueberry leaves. Green selenium nanoparticles were synthesized using sodium selenite salt under heating conditions at 80 degrees and under stirring conditions for 2 hours. Nanoparticle synthesis was investigated using visual observations and spectrophotometric analysis. The physical and chemical properties of green selenium nanoparticles were investigated using X-ray diffraction, nanosizer and field emission scanning electron microscopy (FESEM). Color change and increased absorption of blueberry extracts were indicative of nanoparticle synthesis. Particle size analysis in the Nanosizer device and FESEM results showed that the synthesized selenium nanoparticles have a spherical shape and a size in the range of 200 to 320 nm. XRD results showed that the synthesized selenium nanoparticles do not have a crystalline structure and their shape is amorphous and irregular. The biological activities of selenium nanoparticles, including antioxidant and antibacterial properties, were also investigated. The DPPH method was used to determine the antioxidant properties of the nanoparticles, and the results showed that the synthesized nanoparticles have antioxidant properties. The antioxidant properties of selenium nanoparticles synthesized in the fruit of the Jewel variety were greater than those of the Emerald variety and blueberry leaves. Analysis of the antibacterial properties of the nanoparticles showed that these particles are active against both gram-positive and gram-negative bacteria. Further studies showed that with increasing the concentration of nanoparticles, their antibacterial properties also increase. The highest antibacterial effect was observed in Salmonella typhimurium, a gram-negative bacterium, and the diameter of the halo formed increased significantly with increasing nanoparticle concentration. The use of nanoparticles in sunscreens has been welcomed. To measure the sunscreen properties of green selenium nanoparticles, an ethanol extract of the nanoparticles was used. Evaluation of the ultraviolet protection factor (SPF) of selenium nanoparticles showed that the sun protection properties of nanoparticles synthesized by leaf extract were higher than those of blueberry fruit. The findings of this study showed that selenium nanoparticles synthesized by green method, due to their numerous biological properties, can have wide applications in the pharmaceutical, food and care products industries and have great potential for use in food supplements and natural sunscreens.
-
Evaluation of Donalila Salina and Spirulina platenssis culture medium using natural waters
2024Microalgae have recently attracted researchers' attention due to the numerous valuable products that can be extracted from them. These products range from simple biomass for animal and aquaculture feed to high-value products such as biofuels and biodiesel extracted from microalgal biomass. Given the high biodiversity of microalgae, this group of organisms is one of the most promising sources for new products and applications. Developing precise and cost-effective cultivation methods for microalgae can meet the high demands of the food and energy industries. Reducing cultivation costs is one of the most critical stages in commercial-scale microalgae cultivation in the energy sector. The development and introduction of a low-cost medium can help reduce cultivation costs. Along with cost reduction as a primary concern, it must be ensured that the required nutrients are available in an appropriate form and at non-inhibitory concentrations. Various studies have been conducted on introducing different culture media for microalgae. The aim of this research is to use natural culture media to save costs and achieve the highest yield with the least contamination. In this study, the cultivation of two microalgae, Dunaliella salina and Spirulina platensis, in natural waters was evaluated as an alternative to conventional culture media, and their effects on growth, cell count, biomass production, fatty acid profile, chlorophyll a, chlorophyll b, total chlorophyll, and carotenoids in Dunaliella salina and Spirulina platensis were studied. The antioxidant properties of the biomass of both microalgae were also examined. For each set of data, an analysis of variance was conducted to compare the means, and the Duncan test was used to evaluate the significance of the differences between the means. Data analysis was performed using SPSS20 software. The results showed that the growth curve patterns of the two microalgae, Spirulina platensis and Dunaliella salina, were generally similar but had some differences. For Dunaliella salina, the highest growth was observed in the sample cultivated in the Eshtahard River, while the lowest growth was observed in the sample cultivated in Lake Zaribar. For Spirulina platensis, the highest growth was observed in the control sample (Zarrouk medium), followed by the Eshtahard River, and the lowest growth was observed in the sample cultivated in the Caspian Sea. Comparing the dry weight of the biomass of the two microalgae showed that for Spirulina platensis, the highest dry weight was in the control sample, and the lowest dry weight was in the sample cultivated in Lake Zaribar. For Dunaliella salina, the highest dry weight was in the sample cultivated in the Eshtahard River. Dunaliella salina produced biomass only in the Eshtahard River and control media, and did not grow or produce biomass in the other samples. GC-Mass analysis showed that the biomass of the control sample of Dunaliella salina contained 13 reported compounds, with the highest abundances being peaks 10 (pentadecanoic acid, 14-methyl, methyl ester) with a relative abundance of 20.42%, and peak 11 (9,12,15-octadecatrienoic acid, methyl ester) with a relative abundance of 18.47%. GC-Mass analysis showed that the biomass of the control sample of Spirulina platensis contained 4 reported compounds, with the highest abundances being peaks 1 (hexadecanoic acid, methyl ester) with a relative abundance of 52.52%, and peak 4 (methyl stearate) with a relative abundance of 19.49%. The amount of carotenoids in Dunaliella salina cultivated in the Eshtahard River was significantly higher compared to the control sample. Comparing the water quality indicators of the Eshtahard River as a natural substitute with the physical and chemical indicators in the artificial culture medium (Guillard medium) showed that the amounts of magnesium, potassium, manganese, sulfate, phosphate, and total nitrogen in the natural water sample from the Eshtahard River were higher compared to the control sample (Guillard medium), while the amounts of zinc, copper, iron, sodium, calcium, and nitrate were higher in the control sample (Guillard medium) than in the natural water sample (Eshtahard River). The comparison of the antioxidant capacity of the biomass of Dunaliella salina and Spirulina platensis cultivated under control conditions and natural water conditions showed that microalgae cultivated in river waters had a higher antioxidant capacity compared to those cultivated in Guillard and Zarrouk media. Additionally, Dunaliella salina had a higher antioxidant capacity compared to Spirulina platensis. Studying various natural culture media and comparing the growth characteristics, pigment composition, protein levels, and fatty acid content of microalgae cultivated in natural media with artificial media can be a promising alternative for mass cultivation of these microalgae, providing a low-cost medium to reduce microalgae production costs. Despite the fact that analytically using natural river water, including the Eshtahard River, as a low-cost culture medium substitute for artificial media requires further research.
-
Production of biodiesel using transesterification method, carbon-based catalyst from sunflower, algae and cooking waste oils
2024The growth of the world population, industrialization, and technological progresses have increased the energy demand. The limited resources of fossil fuels and their problems such as air pollution, emission of greenhouse gases and consequently global warming increased the attempts to find the new sources of energy. Biodiesel is a renewable fuel and suitable alternative for fossil fuels. The most common method to synthesize biodiesel is transesterification which is used in this research. In this work, heterogeneous catalyst potassium oxide deposited on carbon active was used. The K2O/Carbon active catalyst was synthesized from sawdust by using pyrolysis method. The synthesized catalyst was characterized by FTIR, SEM, Raman, XRD, ASAP, and TGA. The effects of the operating conditions on biodiesel synthesis reaction by K2O/Carbon active including reaction temperature and time, molar ratio of methanol to oil, and catalyst dose were investigated by design expert soft version 11. The best operating conditions were chosen, it was reaction temperature 65 °C, time 6 h, molar ratio of methanol to oil 19.5:1, and catalyst dose 3.5 wt.%. At these conditions the biodiesel synthesis yields were 98.67% from sunflower oil, 93.29% from waste cooking oil, and 93.67% from spirulina algae oil. The specifications of the synthesized biodiesel were corresponded with ASTM D6751 and EN 14214.
-
بررسی میانکنش متوتروکسات با پپسین
2024در این پژوهش اثر مصرف طولانی مدت داروی متوتروکسات، که هم برای درمان سرطان و هم برای بیماریهای خودایمنی استفاده میشود، بر ساختار و فعالیت آنزیم پپسین تحت عنوان یکی از مهمترین آنزیمهای معده با روشهای تجربی، محاسباتی و نرم افزاری مورد مطالعه قرار گرفت. مطابق با نتایج بهدستآمده از ازمایشات طیف سنجی مرئی-فرابنفش و فلورسانس مشخص شد که دارو میتواند با آنزیم پیوند برقرار کند و شدت فلورسانس آنزیم پپسین از طریق مکانیسم خاموش کردن ترکیبی استاتیک-دینامیک خاموش شد. همینطور تجزیه و تحلیل پارامترهای ترمودینامیکی اتصال دارو به آنزیم نشان داد که نیروهای اصلی در تشکیل کمپلکس، پیوندهای هیدروژنی و یونی است. در آزمایشات مراحل بعدی که اثرات دارو بر فعالیت آنزیم مورد بررسی قرار گرفت و نتایج بهدستآمده نشان داد که در حضور دارو، فعالیت آنزیمی پپسین مهار شد و پارامترها نشان داد که مهار آنزیم از نوع نارقابتی است. در مطالعات مربوط به FTIR مشخص شد که اتصال دارو به آنزیم تغییرات قابل توجهی در ساختار آنزیم ایجاد نکرده و احتمالاً گروههای آمینی در متوتروکسات درگیر پیوند با آنزیم هستند. همچنین دناتوراسیون حرارتی آنزیم پپسین در حضور دارو نشان داد که دارو انرژی فعالسازی دناتوراسیون حرارتی آنزیم پپسین را افزایش داده و به عبارتی دارو باعث افزایش پایداری حرارتی آنزیم پپسین شد. در آخر با انجام فرایندهای داکینگ مولکولی، انرژی اتصال میان لیگاند و پروتئین و آمینواسیدهای درگیر در این اتصال مشخص شد .
-
Untargeted metabolomics analysis and α-glucosidase inhibitory activity of Crocus pallasii subsp. haussknechtii stigma
2024Plants that contain high levels of phytochemicals are considered useful for the discovery and development of medications. There has been considerable research on the biological properties of the genus Crocus. Crocus pallasii subsp. haussknechtii (C. pallasii) belongs to Iridaceae family, commonly known as JoeQāsem saffron and is mostly grown in the Zagros highlands of Iran, northern Iraq, and southern Jordan. To date, few studies have investigated the metabolome and biological properties of this species. The objective of this study is to determine the chemical composition, the ability to inhibit alpha-glucosidase, and the cytotoxic effect of stigma of Crocus pallasii. The metabolome of ethanolic stigmas extract of Crocus pallasii was analyzed by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS), liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS), and high-performance liquid chromatography (HPLC). The MTT technique was used to assess cytotoxic activity against Hep G2 cell line and alpha-glucosidase inhibition assay was used to assess antidiabetic efficacy. GC-MS indicated that fatty acids are the main volatile constituents of the extract. The bioactive components of saffron, safranal and crocin, were also found in the ethanol extract of the stigmas of C. pallasii. Based on HPLC analysis, safranal and crocin concentrations were 0.27 and 14.23 mg/g of dry extract, respectively. The ethanolic stigma extract of Crocus pallasii and crocin blocked α-glucosidase activity in an uncompetitive way. In addition, ethanol stigma extract of C. pallasii showed toxicity against HepG2 liver cancer cell lines. Thus, C. pallasii stigmas contain high levels of bioactive components, especially safranal and crocin, and possess antidiabetic and anticancer properties, suggesting its potential as a natural medication source.
-
Investigating the effect of Satureja Sahendica Bornm essential oil on cell viability and antioxidant defense of cancer cells
2023Despite all the research that has been carried out for years in various clinical and basic fields for the treatment of cancer, cancer is still considered man’s fierce enemy. Unfortunately, until now, existing treatment methods to get rid of this stubborn enemy have been less effective. The lack of effectiveness of treatments can be attributed to a variety of factors, including the fact that most of the treatments available do not work specifically for cancer treatment, causing the normal cells of the body to be affected, resulting in sometimes irreversible side effects. Also, many drugs used to treat cancer are very hydrophobic, which limited their use. Finally, it can be mentioned that the short half-life of chemotherapy drugs, has limited their effectiveness. These problems have forced researchers to turn to nature for success against this stubborn enemy. In this regard, this research investigated the effect of Sahandian savory essential oil on inhibiting cell proliferation and inducing death in two cell lines, MDA-MB-231 (breast cancer) and A549 (lung cancer). Sahendian savory, with the scientific name Satureja Sahendica Bornm, is a member of the family Lamiaceae. It is known as savory in most parts of Iran. There are 15 species of it in Iran, mostly in the western and northwestern regions. They grow on mountain slopes and on limestone and stony rocks. According to research, it was found that the essential oil of this plant mostly contains thymol, gamma-terpinene, para-cymene, and carvacrol. In this research, the effect of Sahendian savory essential oil at different concentrations on the survival of MDA-MB-231 and A549 cells over two periods of 24 and 72 hours was investigated by the MTT test. However, considering that the MTT test does not have the ability to detect the type of cell death, to check the type of cell death induced by the essential oil, two methods of acridine-orange-ethidium-bromide staining and a flow cytometry assay based on AnnexinV-FITC/PI staining were used. In both methods, the cells were first treated with the IC50 concentrations of the essential oil, and then stained according to the instructions. Using a fluorescent microscope, cells stained with acridine-orange-ethidium-bromide were imaged. Cells treated with AnnexinV-FITC/PI were analyzed by flow cytometry. The results showed that the essential oil at a concentration of 0.69 (in 24 hours) and 0.28 mg/mL (in 72 hours) caused the death of 50% of MDA-MB-231 cells, and at a concentration of 0.59 (in 24 hours) and 0.37 mg/mL (in 72 hours) caused the death of 50% of A549 cells. Therefore, the cytotoxic effect of Sahendian savory essential oil on both cell lines was concentration- and time-dependent. Fluorescent microscope images and flow cytometry analysis showed that Sahendian savory essential oil causes death in MDA-MB-231 and A549 cancer cells by inducing apoptosis. Further, taking into account that free thiol groups in healthy and living cells usually exist in a reduced form and a decrease in the level of free thiol increases the sensitivity of cells to apoptosis, the total content of free thiol in MDA-MB-231 cells treated with the IC50 concentration of Sahendian savory essential oil was measured. The results showed that the amount of free thiol groups in the cell lysate of MDA-MB-231 cells decreased with the increase in the concentration of Sahendian savory essential oil, which is a precursor to the process of apoptosis in these cells. Therefore, Sahendian savory essential oil contains compound(s) that cause the death of MDA-MB-231 and A549 cells through apoptosis.
-
بررسی نقش آهن بر بقای سلول های سرطان سینه
2023سرطان سینه یکی از شایع ترین سرطان ها و از علل مرگ و میر ناشی از سرطان در زنان است. آهن عنصری ضروری برای حفظ حیات در موجودات زنده است که در بسیاری از فرآیندهای زیستی شرکت می کند. تجمع زیاد آهن و پراکسیداسیون لیپیدی موجب وقوع نوعی مرگ سلولی به نام فروپتوز می شود. آهن دارای دو نقش مهم در ایجاد سرطان است. اول، به عنوان آغازگر تومور از طریق مشارکت در شیمی فنتون و ایجاد جهش های سرطان زا. دوم، عنصری ضروری در رشد تومورها است. نقش آهن در درمان سرطان را نیز می توان از دو بعد مورد بررسی قرار داد: 1- ایجاد اضافه بار آهن، حمله ی اکسیداتیو و القای مرگ سلولی در سلول های سرطانی. 2- خارج کردن آهن از دسترس سلول های سرطانی به وسیله ی شلاتورهای آهن. از شلاتورهای آهن برای درمان اضافه بار آهن ناشی از تزریق خون در بیماران مبتلا به تالاسمی ماژور استفاده می شود. دو شلاتور پر کاربرد آهن دفریپرون و دفرازیروکس می باشند. دوکسوروبیسین از داروهای رایج در شیمی درمانی است، اما دارای یک دوز سمی محدودکننده است چون موجب آسیب به عضلات قلبی می شود. به همین علت، یافتن داروهای جدید با اثرگذاری بیشتر و عوارض کمتر در درمان سرطان هم چنان یک موضوع تحقیقاتی مهم است. در این پژوهش اثر FeSo4و شلاتورهای آهن شامل دفریپرون و دفرازیروکس روی رده های سلولی MDA-MB-231 و MCF-7 با تست MTT مورد بررسی قرار گرفت. از دوکسوروبیسین به عنوان کنترل استفاده شد. هم چنین سمیت دوکسوروبیسین در حضور FeSo4 بررسی گردید. القای مرگ سلولی به روش آپوپتوز در دو رده ی سلولی توسط سه دارو با کیت سنجش فعالیت کاسپاز-3/7 مطالعه شد. نتایج نشان داد FeSo4 با IC50 بیش از 2 میلی مولار سمیت و اثر سیتوتوکسیک زیادی بر سلول های سرطان سینه ندارد. دفریپرون و دفرازیروکس بر سلول های سرطان سینه اثر سیتوتوکسیک داشتند. اثر سیتوتوکسیک دفرازیروکس بر روی هر دو رده سلولی قوی تر از اثر دفریپرون بود. هم چنین دفرازیروکس روی MCF-7 در زمان 72 ساعت اثر قوی تری در مقایسه با MDA-MB-231 داشت. بررسی درصد بقای سلول های MDA-MB-231 و MCF-7 در بازه ی زمانی 48 و 72 ساعت در حضور دوکسوروبیسین و FeSo4 نشان داد اثر سیتوتوکسیک دوکسوروبیسین در تمام غلظت ها در حضور و عدم حضور FeSo4 با یکدیگر تفاوت معناداری ندارد. بررسی فعالیت کاسپاز-3/7 در سلول های MCF-7 تحت تیمار با دفریپرون نشان داد این سلول ها فعالیت کاسپاز بالاتری در مقایسه با کنترل دارند که بیانگر فعال شدن کاسپاز-3/7 به عنوان یکی از نشانگرهای مرگ سلولی به روش آپوپتوز در این سلول ها است.
-
بررسی فیتوشیمیایی اسانس گل اروانه ی اورامانی (Hymenocrater longiflorus Benth.) و اثر آن بر تکثیر سلول های سرطان سینه
2023علی رغم پیشرفت در زمینه ی استراتژی های درمانی، سرطان سینه هنوز به عنوان دومین عامل مرگ جهانی ناشی از سرطان در میان زنان است. مرگ و میر ناشی از سرطان سینه اغلب به دلیل متاستاز سرطان و مقاومت به درمان می باشد. درمان معمول سرطان سینه از طریق شیمی درمانی است که باعث ایجاد آسیب بافتی شدید و التهاب می شود که ممکن است کارایی این روش را کاهش داده و سبب افزایش عود متاستاز سرطان شود. بنابراین، نیاز به تدوین استراتژی های هدفمند ضد سرطانی کارآمدتر وجود دارد. ویژگی های درمانی ضد سرطانی گیاهان دارویی و ترکیبات زیست فعال آن ها در طی چندین سال گزارش شده است، تولید اسانس ها یا ترکیبات مشتق از آن ها می تواند یک منبع امیدوارکننده به عنوان داروهای ضد سرطان جدید باشد.Hymenocrater یک جنس مهم از خانواده ی نعناعیان (Lamiaceae) است. گیاه اروانه ی اورامانی با نام علمی Hymenocrater longiflorus Benth. یکی از گونه-های این جنس است. این گیاه بومی مناطق غرب ایران (استان های کردستان و کرمانشاه) است. گل اروانه ی اورامانی از کوه های اورامانات استان کرمانشاه جمع آوری شد و اسانس آن توسط روش تقطیر با آب به کمک دستگاه کِلونجر استخراج شد. در این مطالعه، ترکیبات شیمیایی و فعالیت سیتوتوکسیک اسانس مورد بررسی قرار گرفت. 51 ترکیب شیمیایی موجود در اسانس از طریق آنالیز کروماتوگرافی گازی متصل به طیف سنج جرمی (GC-MS) مشخص شد که ترکیبات هیدروکربنی مختلفی از جمله آلکان ها، منوترپن ها و سزکویی ترپن ها بودند. در این مطالعه برای اولین بار اثر سیتوتوکسیک غلظت های مختلف اسانس بر روی دو رده ی سلولی رایج سرطان سینه شامل MCF-7 و MDA-MB-231 در بازه های زمانی 48 و 72 ساعت با تست MTT بررسی شد. نتایج نشان داد که اسانس به صورت وابسته به غلظت و وابسته به زمان سبب مرگ هر دو رده ی سلولی می شود. مقادیر IC50 اسانس برای MDA-MB-231 در زمان های 48 و 72 ساعت به ترتیب برابر با 19/0 و 13/0 میلی گرم در میلی لیتر و برای رده ی MCF-7 در زمان های 48 و 72 ساعت به ترتیب برابر با 52/0 و 07/0 میلی گرم در میلی لیتر بود. جهت تعیین نوع مرگ سلولی، سلول ها با غلظت IC50 از اسانس تیمار و با استفاده از رنگ آمیزی دوگانه ی آکریدین اورنج-اتیدیوم برماید و هم چنین کیت آنکسین-PI مورد بررسی قرار گرفتند. سلول های تیمار شده با آکریدین اورنج-اتیدیوم برماید در زیر میکروسکوپ فلورسنت مشاهده شدند. سلول های انکوبه شده با رنگ پروپیدیوم یدید (PI) همراه با انکسین V در دستگاه فلوسایتومتری آنالیز شدند. نتایج نشان داد که آپوپتوز مکانیسم اصلی مرگ سلولی است. در مجموع، یافته های ما نشان داد که اسانس گل اروانه ی اورامانی حاوی ترکیباتی است که قادر به القای آپوپتوز در سلول های سرطان سینه می باشند.
-
بررسی اثر مسدودکننده های کانال های کلسیمی بر بقای سلولهای سرطانی رده ی MCF-7 و MDA-MB-231
2022سرطان سینه دومین علت مرگ و میر ناشی از سرطان در زنان است. سرطان سینه یک فرایند چند مرحله ای است که شامل انواع مختلف سلول ها می شود و پیشگیری از آن در جهان همچنان چالش برانگیز است. تشخیص زود هنگام سرطان سینه یکی از بهترین روش ها برای پیشگیری از این بیماری است. تنظیم افزایشی کانال های کلسیمی در تکثیر و پیشرفت سلول های سرطانی از جمله در سرطان سینه نقش دارد. داروهای مسدودکننده کانال های کلسیمی از نظر شیمیایی یک گروه ناهمگن هستند، که از ورود کلسیم به داخل سلول های انقباضی عروق و قلبی جلوگیری می کنند. نشان داده شده است که مسدودکننده های کانال های کلسیمی اثرات سیتوتوکسیک را در چندین نوع سرطان اعمال می کنند. در این پژوهش اثر سیتوتوکسیک آملودیپین و دیلتیازم به عنوان داروهای مسدودکننده ی کانال های کلسیمی در حضور و غیاب دوکسوروبیسین بر دو رده ی سلولی سرطان سینه ی انسانی شامل MDA-MB-231 و MCF-7 مورد بررسی قرار گرفت. ابتدا غلظت های مختلف از داروها تهیه شد. سپس اثر هرکدام از آنها به تنهایی، در ترکیب با دوکسوروبیسین (دو تا غلظت پایین از داروها با کمترین اثر سیتوتوکسیک) و ترکیب دو دارو با همدیگر بر تکثیر و بقای سلول ها در دو بازه زمانی 48 و 72 ساعت با روش MTT ارزیابی شد. نتایج نشان داد که آملودیپین و دیلتیازم اثر مهاری بر تکثیر سلول های سرطانی MDA-MB-231 و MCF-7 به روش وابسته به غلظت و زمان دارند. اثر آملودیپین بر هر دو رده در مدت زمان 48 ساعت مشابه بود، اما در 72 ساعت برای سلول های MCF-7 سمیت بیشتری داشت. اثر دیلتیازم بر هر دو رده ی سلولی مشابه بود. مقایسه ی اثر سیتوتوکسیک آملودیپین و دیلتیازم با یکدیگر نشان داد که سمیت هر دو دارو بر رده ی MDA-MB-231 مشابه است اما آملودیپین در مقایسه با دیلتیازم، سمیت بیشتری برای MCF-7 دارد. بررسی اثر سیتوتوکسیک دوکسوروبیسین در حضور داروها نشان داد که آملودیپین مانع فعالیت دوکسوروبیسین می شود اما اثر دیلتیازم بسته به غلظت دوکسوروبیسین و زمان متفاوت بود. دیلتیازم با برخی غلظت های دوکسوروبیسین تداخل داشت و در برخی غلظت ها اثر آن را تشدید می کرد. ارزیابی فعالیت کاسپاز-3/7 در لیز سلول های تحت تیمار با داروها نشان داد که آملودیپین سبب افزایش فعالیت کاسپاز-3/7 در هر دو رده ی سلولی می شود که نشانگر القای آپوپتوز در سلول ها است. در سلول های تحت تیمار با دیلتیازم، فعالیت کاسپاز-3/7 فقط در سلول های MCF-7 مشاهده شد، در حالیکه فعالیت کاسپاز-3/7 در سلول های MDA-MB-231 کمتر از کنترل بود که اظهارنظر در این خصوص نیازمند آزمایش های بیشتر است.
-
بررسی اثر آنتاگونیست های سیستم رنین آنژیوتانسین بر بقای سلولهای رده MDA-MB-231 و MCF-7
2022سرطان پستان یک بیماری در بین زنان است که تاکنون درمان قطعی برای آن یافت نشده است و سالانه تعداد زیادی از زنان به دلیل ابتلا به این بیماری جان خود را از دست می دهند. سیستم رنین آنژیوتانسین یک سیستم غدد درون ریز است. اجزا این سیستم در تعدادی از سلول های بدن و همچنین در سرطان پستان بیان می شوند. مهارکننده های آنزیم مبدل آنژیوتانسین ((ACE به طور گسترده به عنوان عوامل ضد فشارخون مورداستفاده قرار می گیرند. پیشنهادشده است که آن ها خطر ابتلا به برخی سرطان ها را کاهش می دهند، اگرچه داده های موجود متناقض هستند. دوکسوروبیسین از داروهای متداول شیمی درمانی است که برای درمان سرطان پستان نیز از آن استفاده می کنند. یکی از عوارض جانبی دوکسوروبیسین، سمیت برای سلول های قلبی است. به همین دلیل تلاش برای یافتن داروهای ضدسرطان با عوارض جانبی کمتر ادامه دارد. در این پژوهش اثر مهارکننده های سیستم رنین آنژیوتانسین روی رده های سلولی MCF-7 و MDA-MB-231 با تست MTT موردبررسی قرار گرفت. در این پژوهش از چهار دارو (انالاپریل، کاپتوپریل، والسارتان و لوزارتان) و دوکسوروبیسین به عنوان کنترل و داروی شیمی درمانی مؤثر روی سلول ها استفاده شد. هم چنین سمیت دوکسوروبیسین در حضور داروهای مهارکننده ی سیستم رنین آنژیوتانسین بررسی شد. القای آپوپتوز در سلول ها با کیت سنجش فعالیت کاسپاز-7/3 بررسی شد. نتایج نشان داد که انالاپریل با IC50 بیش از 500 میکروگرم در میلی لیتر سمیت زیادی برای سلول های سرطان سینه ندارد. کاپتوپریل و لوزارتان بر سلول های سرطانی اثر سیتوتوکسیک داشتند. والسارتان نه تنها بر سلول ها اثر سیتوتوکسیک نداشت بلکه با افزایش زمان، تکثیر سلول ها را افزایش داد. بررسی درصد بقای سلول های MDA-MB-231 و MCF-7 در حضور دوکسوروبیسین و هر کدام از داروها نشان داد که انالاپریل، کاپتوپریل، والسارتان و لوزارتان بسته به غلظت و زمان قادر به حفاظت از سلول های سرطانی در برابر اثر سیتوتوکسیک دوکسوروبیسین هستند. بررسی فعالیت کاسپاز-7/3 در سلول های MDA-MB-231 تحت تیمار با کاپتوپریل و لوزارتان نشان داد که سلول های تیمارشده فعالیت کاسپاز-7/3 بالاتری در مقایسه با کنترل دارند که نشانگر فعال شدن کاسپاز-7/3 به عنوان یکی از نشانگرهای آپوپتوز است.
-
بررسی باقیمانده ی سرین 334 در دایمری شدن و فعالیت کاسپاز-9 انسانی
2021کاسپاز-9 یک عامل کلیدی در مسیر مرگ میتوکندریایی است که فعالیت آن با سازوکارهای مختلفی تنظیم می شود. یکی از این سازوکارهای تنظیمی، فسفریلاسیون است که توسط کینازهای فعال شده در مسیرهای پیام رسانی مختلف در سلول اعمال می شود. فسفریلاسیون کاسپاز-9 بسته به باقیمانده ی آمینواسیدی اثر فعال کنندگی یا مهاری بر فعالیت آنزیم دارد. تحقیقات نشان داده است که باقیمانده ی سرین در موتیف Φ-X-X-S/T (Φ: اسیدآمینه ی آبگریز، X: هر نوع اسیدآمینه، S: سرین و T: ترئونین) مستعد فسفریلاسیون توسط سرین/ترئونین کینازها است. با توجه به قرارگیری سرین 334 در توالی آمینواسیدی کاسپاز-9 در چنین موتیفی، به نظر می رسد این ریشه هم مستعد فسفریلاسیون باشد. با توجه به اینکه فسفریلاسیون سرین 334 منجر به ایجاد بار منفی در این موقعیت می شود، در این پژوهش سرین 334 با روش جهش زایی Quick change به آسپارتات (فسفومیمتیک) جهش داده شد. پس از تائید ایجاد جهش با تعیین توالی، آنزیم تیپ وحشی و جهش یافته در سیستم باکتریایی بیان و با روش کروماتوگرافی گرایشی تخلیص شد. فعالیت آنزیم جهش یافته با تیپ وحشی در دماهای 4، 15، 25، 30، 37، 45 و 60 درجه ی سانتی گراد بررسی شد. نتایج نشان داد که دمای مطلوب فعالیت آنزیم وحشی و جهش یافته به ترتیب 30 و 25 درجه ی سانتی گراد است. هم چنین آنزیم جهش یافته در دمای 4 و 60 درجه ی سانتی گراد فعالیت کمتری در مقایسه با آنزیم وحشی داشت. به نظر می رسد کاسپاز-9 دارای جهش در سرین 334 در دماهای پائین و بالا پایداری کمتری داشته باشد. به منظور تعیین پارامترهای سینتیکی شامل Km (ثابت میکائیلیس–منتن) Vmax (سرعت ماکزیمم) و kcat (ثابت سرعت کاتالیتیک)، فعالیت آنزیم های وحشی و جهش یافته در حضور غلظت های مختلف (04/0، 06/0، 08/0، 1/0 و 14/0 میلی مولار) از سوبسترای کروموژنیک Ac-LEHD-pNA کاسپاز-9 سنجش شد. Km آنزیم وحشی و جهش یافته به ترتیب 63/60 و 69/143 میکرومولار بود. بنابراین جهش سرین 334 به آسپارتات سبب افزایش Km و کاهش تمایل آنزیم به سوبسترا شد. kcat و Vmax دو آنزیم تفاوت معناداری نداشتند. به دلیل افزایش Km، ثابت ویژگی آنزیم جهش یافته کمتر از آنزیم وحشی بود. هم چنین کاسپاز-9 جهش یافته ی S334D مانند کاسپاز-9 وحشی برای دایمر شدن و فعالیت آنزیمی وابسته به آمونیوم سیترات بود. در مجموع با توجه به قرارگیری سرین 334 کاسپاز-9 در توالی آمینواسیدی مستعد فسفریلاسیون و کاهش Km و کارائی کاتالیتیک، به نظر می رسد فسفریلاسیون این ریشه اثر کاهشی بر تنظیم فعالیت کاسپاز-9 و مهار آنزیم توسط مهارکننده ی فیزیولوژیک آن (XIAP) داشته باشد. مطالعات بیشتر جهت بررسی توانایی کاسپاز-9 جهش یافته در فعال کردن سوبسترای فیزیولوژیک آن (پروکاسپاز-3)، مهار توسط XIAP و اجرای آپوپتوز پیشنهاد می-شود.
-
بررسی اثر روتنون بر روی تغییرات بیان ژن های Mfn1 وMfn2 در رده ی سلولیSH-SY5Y انسانی
2021پیشینه تحقیق: میتوکندری ها اندامک های کلیدی درون سلول ها با ساختارهایی پویا و دارای غشاء دو لایه و DNA مستقل هستند. پروتئین های مربوط به فرآیندهای پویایی میتوکندریایی همچون همجوشی، شکافت، حمل و نقل و میتوفاژی در بسیاری از بیماری های عصبی مانند پارکینسون، آلزایمر و غیره نقش دارند. طی سال های گذشته از روتنون برای ایجاد مدل سلولی و حیوانی شناخته شده ای برای بیماری پارکینسون استفاده شده است. مطالعات بسیاری استفاده از آنتی اکسیدان ها را برای محافظت در برابر اختلالات تخریب کننده عصبی مانند پارکیسنون پیشنهاد کرده اند. آلفا لیپوئیک اسید (ALA) با کاهش سطح رادیکال-های آزاد اکسیژن به عنوان یک آنتی اکسیدان قوی نشان داده شده است. هدف از این مطالعه، بررسی میزان بقای سلولی و تغییرات بیان ژن های همجوشی میتوکندری mfn1 و mfn2 در سلول های SH-SY5Y تیمار شده با روتنون و ALA بود. روش بررسی: در ابتدای پروژه با روش MTT اثر سمیت روتنون بر روی رشد سلول های SH-SY5Y ارزیابی شد. سپس تاثیر غلظت های مختلف آلفالیپوئیک اسید در بقای سلول های SH-SY5Y تیمار شده به مدت 48 ساعت با روتنون بررسی شد. در ادامه بیان ژن های mfn1 و mfn2 با روش ریل تایم PCR مورد ارزیابی قرار گرفت یافته ها: بر اساس محاسبات IC50 اثر سمیت روتنون در غلظت های بالاتر از 1 میکرومولار مشخص شد. بررسی اثر دو غلظت 2.5 و 5 میکرومولار روتنون به مدت 24 و 48 ساعت روی بقای سلول های SH-SY5Y در شرایط کشت معمولی و بعد از القای تمایز تفاوت معنی داری را در بین گروه های آزمایشی نشان داد. بررسی تاثیر غلظت های مختلف آلفالیپوئیک اسید بر بقای سلول های SH-SY5Y تمایز نیافته و تمایز یافته، پس از 48 ساعت تیمار با روتنون نشان داد که تفاوتی بین گروه دریافت کننده ی روتنون با گروه های دریافت کننده روتنون و آنتی اکسیدان مشاهده نشد. این نتایج نشان داد که حضور آنتی اکسیدان آلفالیپوئیک اسید تاثیری در بهبود سمیت ناشی از روتنون در بقای سلول های SH-SY5Y ندارد. مطالعه کمی بیان ژن های mfn1 و mfn2 با استفاده از روش Real time-PCR انجام شد. نتایج qPCR نشان داد که در سلول های کشت داده شده در محیط کشت معمولی ، بیان ژن های mfn1 و mfn2 در حضور 5 میکرومولار روتنون کاهش معنی داری را نشان می دهد (P<0.001). همچنین در این سلول ها بیان ژن های mfn1 و mfn2 در حضور آلفالیپوئیک اسید و روتنون در مقایسه با گروه دریافت کننده روتنون به تنهایی افزایش یافته است (P<0.0001). در سلول های تمایز یافته بیان ژن mfn1 تغییر معنی داری را نشان نداد، اما سطح بیان ژن mfn2 افزایش معنی داری را نسبت به بقیه گروه ها نشان داد (P=0.014). نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشان داد که سطح mRNA ژن های mfn1 و mfn2 در پاسخ به اثر سمیت روتنون تغییر کرده است. به این ترتیب تغییر بیان ژن های شکافت میتوکندری می تواند در پیشرفت بیماری پارکینسون و یا در کنترل آن نقش داشته باشد.
-
بررسی اثرات ضدتوموری ترشری- بوتیل پراسترهای سنتزی بر رده های سلول سرطانی MDA-MB-231 و MCF-7
2021سرطان سینه دومین سرطان شایع در سراسر جهان در میان زنان می باشد. شیمی درمانی یکی از روش های رایج درمان سرطان سینه است که با چالش های زیادی از جمله عود، مقاومت در برابر دارو و عوارض جانبی ناخواسته همراه می باشد. بنابراین تلاش برای یافتن ترکیبات ضدسرطانی جدید ادامه دارد. به همین منظور، در این پژوهش، اثر ضدسرطانی 6 مشتق ترشری بوتیل پراستر سنتزی بر دو رده ی سلولی سرطان سینه شامل MDA-MB-231 و MCF-7 بررسی شد. در ابتدا اثر ترکیبات بر بقای رده های سلولی در کشت تک لایه موردبررسی قرار گرفت. در کشت تک لایه، سلول ها در پلیت های 96 خانه ی کف صاف کشت و با غلظت-های 2، 5، 10 و 20 میکروگرم در میلی لیتر از ترکیبات در دو بازه ی زمانی 48 و 72 ساعت تیمار شدند. از داروی دوکسوروبیسین با غلظت های 1/0، 5/0، 1و 5 میکروگرم در میلی لیتر به عنوان کنترل مثبت استفاده شد. از آنجایی که مورفولوژی و میان کنش سلول ها در کشت سه بعدی شباهت بیشتری به شرایط In vivo دارند، اثر مشتقات ترشری بوتیل پراستر دارای اثر ضدتکثیری در کشت تک لایه، بر بقای سلول ها در کشت سه بعدی هم موردبررسی قرار گرفت. میزان بقای سلول ها با تست MTT سنجش شد. براساس نتایج بدست آمده، 4 مشتق بر بقای هر دو رده ی سلولی بی اثر بودند. دو مشتق شامل ترشری بوتیل 4-نیتروپربنزوات (1SS) و ترشری بوتیل 3و5 دی نیتروپربنزوات (6SS) سمیت سلولی وابسته به غلظت و وابسته به زمان بر رده های سلولی داشتند. سمیت سلولی این ترکیبات بر رده ی MDAMB-231 بیشتر از MCF-7 بود. هم چنین اثر سمیت سلولی ترکیبات در کشت تک لایه بیشتر از کشت سه بعدی بود. تعداد قابل توجهی از بیماران مبتلا به سرطان سینه در سیر بیماری خود دچار متاستاز شده که عامل مهمی در شکست درمان، عوارض و مرگ و میر بیماران می باشد. ماتریکس متالوپروتئینازها (MMP) خانواده ای از آنزیم های پروتئولیتیک هستند که در هضم پروتئین های ماتریکس خارج سلولی و افزایش رفتار متاستازی تومورهای بدخیم انسانی نقش مهمی دارند. جهت بررسی میزان فعالیت MMP-9 به عنوان یکی از ماتریکس متالوپروتئینازهای فعال در سرطان سینه، زایموگرافی انجام شد. میزان فعالیت MMP-9 در محیط کشت سلول های تیمارشده با ترکیبات 1SS و 6SS، مشابه دوکسوروبیسین بود. هم-چنین فعالیت ضداکسایشی همه ی مشتقات سنتزی ترشری بوتیل پراستر، با استفاده از تست های DPPH و ABTS مورد بررسی قرار گرفت. هیچکدام از ترکیبات فعالیت ضداکسایشی قابل توجهی در مقایسه با ویتامین C نداشتند. طبق یافته های حاضر، ترشری بوتیل 4-نیتروپربنزوات (1SS) و ترشری بوتیل 3و5 دی نیتروپربنزوات (6SS) با داشتن اثر ضدتکثیری بر بقای سلول های MDA-MB-231 و MCF-7 می توانند کاندیدای مناسبی جهت مطالعات بیشتر در زمینه سرطان سینه باشند.
-
بررسی اثر سمیت سلولی و فعالیت ژلاتیناز در سلول های سرطان سینه ی انسانی رده ی MDA-MB-231 تیمار شده با اسانس آویشن دنایی
2021سرطان سینه یکی از شایع ترین سرطان ها در میان زنان است که از تکثیر بی رویه ی سلول های اپی-تلیال پستان ایجاد می شود. شیمی درمانی یکی از متداول ترین روش درمانی سرطان سینه است که با عوارض جانبی بسیار زیادی مانند مرگ سلول های سالمِ در حال تکثیر و مقاومت دارویی همراه است. تلاش برای یافتن ترکیبات جدید و فاقد عوارض جانبی ضروری به نظر می رسد. یکی از راهکارها، جستجوی ترکیبات ضدسرطانی جدید در منابع طبیعی و گیاهی است. آویشن دنایی با نام علمی Thymus daenensis Celak. یکی از گیاهان دارویی متعلق به خانواده یLamiaceae است که حاوی ترکیبات دارویی ارزشمندی است. در این پژوهش برای اولین بار اثر غلظت های مختلف اسانس آویشن دنایی بر دو رده ی سلولی سرطان سینه شامل MDA-MB-231 و MCF-7 در مدت زمان های 24 و 48 ساعت در کشت تک لایه و کشت سه بعدی با تست MTT بررسی شد. نتایج نشان داد که اسانس آویشن دنایی به صورت وابسته به غلظت و وابسته به زمان مرگ سلولی را در هر دو رده ی سلولی القا می کند. IC50 اسانس در کشت سه بعدی بیشتر از کشت تک لایه بود که نشانگر مقاومت سلول های اسفروئیدی به مرگ سلولی است. رده ی سلولی L929 به عنوان سلول سالم، مقاومت بیشتری در برابر اثر سمیت سلولی اسانس داشت که نشان دهنده ی اثر قوی تر اسانس بر سلول های سرطانی است. هم چنین در این پژوهش، اثر اسانس بر فعالیت ماتریکس متالوپروتئینازهای خارج سلولیِ -2 و -9 با روش زایموگرافی مورد بررسی قرار گرفت. این آنزیم ها به علت توانایی هیدرولیز ماتریکس خارج سلولی می-توانند نقش مهمی را در بروز و متاستاز سرطان سینه داشته باشند. فعالیت ماتریکس متالوپروتئیناز-2 در محیط کشت سلول های MDA-MB-231 تیمار شده با غلظت های 2/0 و 5/0 میلی گرم در میلی لیتر اسانس، کاهش معناداری در مقایسه با کنترل داشت. فعالیت ماتریکس متالوپروتئیناز-9 هم در محیط کشت سلول های MDA-MB-231 تحت تیمار اسانس با غلظت 5/0 میلی گرم در میلی لیتر نسبت به کنترل کاهش معناداری داشت. علاوه بر خاصیت ضدسرطانی، خاصیت ضد اکسایشی اسانس با روش ABST بررسی شد. اسانس دارای فعالیت ضد اکسایشی بود. تیمول (79/32%)، متیل اترکارواکرول (307/8%)، پارا-سیمن (024/7%)، بتا-کاریوفیلن (023/7%) و کاریوفیلن اکسید (390/6%) ترکیبات غالب اسانس آویشن دنایی بودند. نتایج این پژوهش نشان داد که اسانس آویشن دنایی یک منبع غنی از ترکیبات با اثر مهاری بر تکثیر سلول های سرطان سینه و فعالیت ضداکسایشی است.
-
مقایسه خواص ضدسرطانی کلاله ی زعفران های (Crocus sativus) مناطق مختلف ایران روی سلول های MDA-MB-231 و MCF-7 سرطان پستان انسانی
2021سرطان بیماری است که از تکثیر کنترل نشده ی سلول ها ناشی می شود. سرطان پستان دومین علت مرگ و میر ناشی از سرطان در سراسر جهان می باشد. رایج ترین روش های درمان سرطان پستان جراحی، شیمی درمانی و پرتودرمانی است که هر کدام اثرات جانبی نامطلوبی برای بیماران به همراه دارند. از این رو تلاش بر این است که ترکیبات شیمی درمانی جدیدی شناسایی شوند که عوارض جانبی کمتری دارند یا عوارض جانبی آن ها را روی سلول های سالم کاهش دهند. زعفران با داشتن ترکیبات دارویی مختلف مانند کروسین و سافرانال مورد توجه محققان در تحقیقات سرطان قرار گرفته است. با توجه به گزارش های مختلف در خصوص اثر ضدسرطانی زعفران، در این پژوهش ما به بررسی خواص ضدسرطانی زعفران های زراعی کشت شده در مناطق مختلف ایران و همچنین اثر تداخلی کروسین و سافرانال بر اثر ضدسرطانی داروی شیمی درمانی دوکسوروبیسین بر دو رده سلولی سرطان پستان (MCF-7 و MDA-MB-231) پرداختیم. ابتدا عصاره های آبی و متانولی از نمونه ها تهیه و سپس اثر سیتوتوکسیک آن ها در غلظت-های مختلف بر بقای هر دو رده ی سلولی در مدت زمان های 48 و 72 ساعت با تست MTT مورد بررسی قرار گرفت. همچنین اثرات متقابل کروسین و سافرانال با دوکسوروبیسین بر بقای هر دو رده سلولی بررسی شد. نتایج نشان داد که این عصاره ها اثر سیتوتوکسیک قابل توجهی بر رده ی سلولی MDA-MB-231 ندارند، اما تاثیر این عصاره ها بر رده سلولی MCF-7 در غلظت های بالاتر و زمان بیشتر مشهود بود. بیشترین اثر سیتوتوکسیک مربوط به زعفران کشت شده در گناباد بود. همچنین اثر سیتوتوکسیک عصاره های متانولی بیشتر از عصاره های آبی بود. کروسین، یک متابولیت ثانویه در زعفران، اثر سیتوتوکسیک بر بقای هر دو رده سلولی داشت، اما سافرانال، دیگر متابولیت ثانویه، در غلظت های مورد استفاده فاقد اثر سیتوتوکسیک بر روی هر دو رده سلولی بود. همچنین این دو ترکیب هیچ اثر تداخلی در فعالیت سیتوتوکسیک داروی دوکسوروبیسین ایجاد نکردند. در این پژوهش هیچ ارتباط معنی داری بین کیفیت و اثر سیتوتوکسیک زعفران ها مشاهده نشد و مطالعات بیشتری مورد نیاز است.
-
اثر عصاره ی متانولی پیاز Crocus cancellatus subsp. damascenus (Herb.) B.Mathew بر تکثیر سلولی و فعالیت ژلاتیناز در سلول های سرطان سینه ی انسانی
2021سرطان سینه یک بیماری پیچیده است که دومین عامل مرگ ومیر زنان در سراسر جهان می باشد. شیمی درمانی یکی از متداول ترین روش درمانی سرطان سینه هستند که با عوارض جانبی بسیار زیادی مانند مرگ سلول های سالمِ در حال تکثیر و مقاومت دارویی همراه است. تلاش برای یافتن ترکیبات بهتر و فاقد عوارض جانبی ضروری به نظر می رسد. یکی از راهکارها، جستجوی ترکیبات ضدسرطانی جدید در منابع طبیعی و گیاهی است. زعفران زاگرس با نام علمی Crocus cancellatus subsp. damascenus (Herb.) B.Mathew یکی از گونه های جنس Crocus است که در منطقه زاگرس می روید. بر این اساس در این پژوهش برای اولین بار اثر سیتوتوکسیک کلاله و بنه ی زعفران زاگرس بر دو رده ی سلولی سرطان سینه شامل MDA-MB-231 و MCF-7 بررسی شد. ابتدا عصاره ی اتانولی از کلاله و عصاره ی متانولی از بنه ی زعفران زاگرس تهیه شد. سپس اثر غلظت های مختلف عصاره ها بر بقای هر دو رده ی سلولی در مدت زمان های 24 و 72 ساعت در کشت تک لایه و کشت سه بعدی با تست MTT بررسی شد. نتایج نشان داد که عصاره ها به صورت وابسته به غلظت و وابسته به زمان سبب مرگ هر دو رده ی سلولی می شوند. اثر سیتوتوکسیک عصاره ی کلاله بیشتر از عصاره ی بنه بود. IC50های عصاره ها در کشت سه بعدی بیشتر از کشت تک لایه بودند که نشانگر مقاومت سلول-های اسفروئیدی به مرگ سلولی است. هم چنین در این پژوهش، اثر عصاره ها بر فعالیت ماتریکس متالوپروتئینازهای خارج سلولیِ -2 و -9 با روش زایموگرافی مورد بررسی قرار گرفت. این آنزیم ها به علت توانایی هیدرولیز ماتریکس خارج سلولی می توانند نقش مهمی را در بروز و متاستاز سرطان پستان داشته باشند. اثر عصاره ها بر فعالیت متالوپروتئینازهای -2 و -9 مانند دوکسوروبیسین (داروی مورد استفاده به عنوان کنترل مثبت) بود. بررسی عصاره ی اتانولی کلاله با استفاده از GC-MS، وجود 28 ترکیب را نشان داد که شناخته شده ترین آنها، اسید چرب اشباع پالمیتیک و اسیدهای چرب غیراشباع اسید لینولئیک، متیل لینولئیک اسید، اولئیک اسید و استئاریک اسید و هم چنین سافرانال بود. وجود سافرانال در عصاره با روش LC-MS هم تائید شد. ترکیب پیکروکروسین هم در عصاره ی اتانولی کلاله با روش LC-MS/MS شناسایی شد. علاوه بر خاصیت ضدسرطانی، خاصیت آنتی اکسیدانتی هر دو عصاره ی بنه و کلاله با روش ABST بررسی شد. عصاره ها فاقد فعالیت آنتی اکسیدانتی بودند. نتایج این پژوهش نشان می دهد که زعفران زاگرس حاوی ترکیب (ترکیبات) با اثر مهاری بر تکثیر سلول های سرطان سینه است.
-
بررسی ترکیبات شیمیایی، اثرات زیستی و دگر آسیبی گیاه .Ferula oreintalis L
2018فیتوشیمی به بررسی انواع متابولیت های اولیه و دومین موجود در گیاهان گفته می شود. متابولیت های دومین ترکیباتی با وزن ملکولی پایین هستند که مستقیما در فرآیند های رشد، نمو یا تولیدمثل یک ارگانیسم زنده دخالتی نداشته، جنس Ferula متعلق به تیره چتریان است. این جنس منبع بالای از متابولیت های دومین می باشد. ترکیبات مختلفی مانند سزکویی ترپن ها، ترکیبات گوگردی، کومارین گلگوزید ها و کومارین ها از این جنس شناسایی شده است، که اثرات زیست شناختی مختلفی را از خود نشان می دهند. کومارین یک ترکیب هتروسیکل اکسیژن دار است که با نام 1و2 بنزوپیرون نیز شناخته می شود. این ترکیبات به طور عمده در ریشه جنس Ferula یافت می شوند. ترکیبات کومارینی دارای اثرات آللوپاتی هستند. هدف از انجام این پژوهش بررسی اثر آللوپاتی ناشی از عصاره برگ و ریشه .Ferula oreintalis L، بررسی اثر مهاری کومارین سنتتیک و عصاره برگ .Ferula oreintalis L بر شاخص های جوانه زنی، فعالیت آمیلازی و نشت الکترولیت دانه رست های گندم و چاودار و بررسی توان آنتی اکسیدانی و اثرات ضد میکروبی عصاره برگ و ریشه .Ferula oreintalis L می باشد. عصاره متانولی برگ گیاه .Ferula oreintalis L به روش سوکسله تهیه و به روش GC-MASS مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. در قالب انجام یک طرح آزمایشی با تاثیر غلظت های مختلف عصاره برگ .Ferula oreintalis L و کومارین سنتتیک بر شاخص های فیزیولوژیک و جوانه زنی و قابلیت اندازه گیری نشت الکترولیت و فعالیت آمیلازی دانه رست های گندم و چاودار بررسی شد. ویژگی آنتی اکسیدانی عصاره متانولی برگ و ریشه .Ferula oreintalis L انجام شد. خاصیت ضد باکتریایی این گیاه با روش های استاندارد میکروبیولوژیکی بر باکتری های استافیلوکوکوس اورئوس و اشریشیاکلی سنجیده شد. نتایج این تحقیق نشان داد که عصاره .Ferula oreintalis L اثر آللوپاتی دارد و باعث کاهش وزن برگ اولیه و ریشه چه و طول آن ها در هر دو گونه دانه رست ها می شود. غلظت 2/0 میلی مولار کومارین و 50 گرم بر لیتر عصاره، شاخص سرعت جوانه زنی را کاهش داده اند. کومارین و عصاره اثر مهاری بر فعالیت آمیلازی گندم و چاودار ندارند اما ممکن است سبب مهار تولید آمیلاز در این بذر-ها شوند. بعد از اعمال غلظت 2/0 میلی مولار و 20 میلی مولار کومارین بر بذر و ریشه چه گندم و چاودار نشان داده شد که در زمان های متوالی،
-
جداسازی و تعیین خصوصیت میکروارگانیسم های بومی با قابلیت تولید نانوذرات مس
2018میکروارگانیسم ها برای سوخت وساز و انجام فرایندهای حیاتی و تأمین انرژی و کاهش سموم محیط زندگی خود، فلزات را در اندازه ی نانو رسوب می دهند. در میان نانوذرات فلزی، نانوذرات مس به خاطر ویژگی های منحصر به فرد کاتالیزگری، هدایت الکتریکی و نوری ویژه و هم چنین مقاومت بالا در برابر خوردگی و کاربرد های بسیار در زمینه های مختلف از جایگاه ویژه ای برخوردار است. اگرچه اثرات سمی یون مس برای اغلب میکروارگانیسم ها گزارش شده است ولی گونه های مختلفی از میکروارگانیسم ها، ازجمله سویه های بومی باکتری آب زی جداسازی شده در این پژوهش می تواند بر سمیت آن با احیای سولفات مس به فرم نانوکوانتوم دات سولفید مس غلبه کند. هدف از مطالعه حاضر، استفاده از توانمندی ذاتی سویه های بومی باکتریایی آب زی به عنوان زیست کاتالیزگر برای احیای زیستی سولفات مس به نانوکوانتوم دات سولفید مس بود. در این راستا، 105 سویه ی باکتری تحمل پذیر نسبت به یون سمی مس، از آب های مناطق مختلف ایران جمع آوری شده و بر اساس تکنیک غنی سازی انتخابی در محیط کشت تریپتیک سوی براث حاوی 1 میلی مولار یون مس، غربالگری و جداسازی شدند. تحمل پذیری ذاتی این سویه ها نسبت به یون سمی مس به وسیله روش رقت در آگار یا کشت نقطه ای تعیین گردید. بر اساس نتایج به دست آمده، 20 سویه ی باکتری که بالاترین مقاومت را نسبت به یون سمی مس (بالاتر از 5 میلی مولار) از خود نشان دادند انتخاب شد و جهت بررسی قابلیت احیای سولفات مس به نانوسولفید مس (به صورت خارج سلولی) در محیط تریپتیک سوی براث مورد بررسی قرار گرفتند. بر اساس نتایج به دست آمده، تنها سوپرناتانت کشت سویه Cu25 جدا شده از آب جمع آوری شده از دریای خزر، قادر به احیای خارج سلولی یون های مس به نانوسولفید مس، در غلظت 5 میلی مولار از یون سمی مس بود. سویه باکتری Cu25 به عنوان سویه ی برتر انتخاب گردید و مورد شناسایی فنوتیپی و مولکولی قرار گرفت. نتایج آنالیزهای ریخت شناسی، بیوشیمیایی و فیلوژنیکی نشان داد که سویه ی مذکور بیشترین مشابهت را به Bacillus licheniformis دارد. توالی نوکلئوتیدی ژن 16S rDNA سویه Cu25 با شماره دسترسیMG857584 در بانک اطلاعات ژنی NCBI قابل دسترس می باشد. در ادامه، سنتز خارج سلولی نانوذرات سولفید مس تولیدشده توسط باکتری B. licheniformis Cu25 تحت شرایط بهینه واکنش زیست تبدیلی مورد بررسی قرار گرفت که